Curso de Enzimología

Laboratorio de Enzimología, Facultad de Ciencias

Descripción: Curso dirigido a estudiantes avanzados y de posgrado. Provee de conceptos de cinética enzimática y de mecanismos, así como de herramientas prácticas para el trabajo con enzimas.

Coordinadora: Beatriz Alvarez (beatriz.alvarez@fcien.edu.uy).

Fecha: Primer semestre, entre el 16 de marzo y el 27 de mayo de 2021.

Primera clase: Martes 16 de marzo, 10 horas, por zoom. Se accederá al código de zoom a través de la plataforma EVA o solicitándolo a beatriz.alvarez@fcien.edu.uy.

https://eva.fcien.udelar.edu.uy/course/view.php?id=568

Teóricos: El contenido teórico se impartirá en forma de dos instancias semanales de dos horas cada una, los días martes y jueves de 10 a 12 horas, durante 10 semanas, entre el 16 de marzo y el 27 de mayo. Estas instancias serán no presenciales y se utilizará zoom. Se alternarán exposiciones teóricas con ejercicios y discusiones de resultados de trabajos científicos. Se realizarán presentaciones de temas y artículos por parte de los estudiantes.

Prácticos: Un práctico de laboratorio por semana de 3 horas, presencial, en la Facultad de Ciencias, salón 304, 9 instancias entre el 19 de marzo y el 21 de mayo. Los prácticos se realizarán en dos turnos los días viernes, entre 10 y 13 horas, o entre 14 y 17 horas. Los estudiantes deberán elaborar un informe en grupo con los resultados de cada práctico.

Ganancia del curso: El curso se ganará por asistencia a los teóricos (60 %) y a los prácticos de laboratorio (80 %), y aprobación de los correspondientes informes. La ganancia del curso habilita a rendir el examen.

Evaluación: Examen.

Inscripciones: En la bedelía de la Facultad de Ciencias. El curso se realizará si la cantidad de inscriptos es mayor a 6.

Temario resumido: Cinética de estado estacionario. Inhibición. Efectos de pH. Efectos de temperatura. Cinética preestacionaria. Mecanismos. Regulación.

Docentes: Beatriz Alvarez, Leonor Thomson, Lucía Turell, Martina Steglich, Mariana Bonilla, Dayana Benchoam, Martín Fló, Ernesto Cuevasanta, Madia Trujillo, Gerardo Ferrer, Laura Coitiño.

Curso auspiciado por PEDECIBA Química y apoyado por PEDECIBA Biología

Mas información (Link a Librito 2021 ENZ)

Temario

Introducción. Historia. Generalidades. Repaso de cinética. Concepto de catálisis. Particularidades de la catálisis enzimática: eficiencia, especificidad de reacción, especificidad de sustrato. Regulación de la actividad. Aspectos estructurales. Isoenzimas. Sustratos, coenzimas y cofactores. Tipos de reacciones. Clasificación. Nomenclatura. Unidades de actividad enzimática.

Cinética de estado estacionario. Velocidades iniciales. Efecto de concentraciones de enzima y sustrato sobre la velocidad. Cinética de saturación. Ecuación de Michaelis y Menten.

Equilibrio versus estado estacionario. Significado de KM, KS, kcat y kcat/KM. Sustratos con alta afinidad. Sistemas reversibles. Ecuación de Michaelis y Menten integrada.

Reacciones de dos sustratos. Tipos de reacción y ecuaciones de velocidad correspondientes.

Regulación de la actividad enzimática. Cinéticas no michaelianas. Alostería y cooperatividad.

Inhibición. Inhibidores reversibles: tipos, esquemas y ecuaciones. Inhibidores de alta afinidad. Inhibidores irreversibles. Inhibidores suicidas.

Efectos del pH. Óptimos de pH y falsos óptimos. Funciones de pH de Michaelis.

Efectos de la temperatura. Teoría del estado de transición. Energía de activación. ΔH, ΔS y ΔG de activación. Inactivación térmica de las enzimas.

Cinética pre estacionaria. Utilidad del estudio del estado pre estacionario. Métodos de flujo. Ecuaciones de los transitorios. Métodos de relajación. Ecuaciones de sistemas próximos al equilibrio. Reacciones irreversibles y reversibles de pseudo primer orden, reacciones consecutivas, cinética de estallido.

Mecanismos de las reacciones enzimáticas. Catálisis ácido base. Catálisis covalente. Catálisis electrostática. Energía de unión en catálisis. Efecto Circe. Estabilización del estado de transición. Efectos de proximidad y orientación. Unión de grupos remotos. Ejemplos detallados.[/vc_column_text][/vc_column][/vc_row]

Curso de Enzimología